Các phương pháp đo hba1c

admin 06/08/2022

HbA1c là 1 phần hemoglobin đang gắn glucose vào địa điểm N valine của chuỗi β. Phản bội ứng này phụ thuộc vào thời gian hồng cầu lưu hành trong máu và nồng độ glucose. Vì chưng tuổi thọ trung bình của các hồng ước là 120 ngày, yêu cầu HbA1c phản chiếu mức đường huyết vừa đủ trong 3 tháng trước đó.

Bạn đang xem: Các phương pháp đo hba1c

Glycomark – xét nghiệm bắt đầu trong theo dõi đường huyết

Những ưu thế của xét nghiệm HbA1c đối với xét nghiệm glucose máu

Phân tích HbA1c hiện nay có thể chia thành 2 nhóm phương pháp chính, dựa trên:

– Phân tách bóc và định lượng những thành phần

– phản nghịch ứng hóa học

Hình ảnh: Các phương thức phân tích HbA1c.

Bạn đang xem: CÁC PHƯƠNG PHÁP XÉT NGHIỆM HBA1C HIỆN nay (PHẦN 1)

PHẦN 1 – PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÁCH

Hemoglobin được glycate hóa (A1c, thêm glucose) và hemoglobin không glycate (A0, không thêm glucose) tất cả các đặc điểm khác nhau, điều này được cho phép phân tách 2 loại và định lượng riêng rẽ A1c cũng như tổng A1c + A0. Các kỹ thuật áp dụng cách thức này, gồm những: sắc ký trao đổi ion (IEC, ion exchange chromatography), điện di mao quản (CE, cappillary electrophoresis), sắc ký ái lực (AC, affinity chromatography).

1. Sắc ký hội đàm ion (Ion exchange chromatography) với Sắc ký lỏng hiệu năng cao (High pressure liquid chromatography)

Do glucose đã nhập vào vị trí β-valine, phải điểm đẳng năng lượng điện của A1c không giống với A0 là 0.02 pI, sự khác biệt này cho phép phân bóc tách bằng sắc đẹp ký thảo luận ion (IEC). Tuy nhiên, sự khác hoàn toàn đẳng điện giữa A1c và A0 là vô cùng nhỏ, chỉ lắp thêm sắc ký kết lỏng tính năng cao (HPLC, high pressure liquid chromatography) mới hoàn toàn có thể thực hiện phân tách chúng. Khi phân tích HbA1c bằng thiết bị HPLC, từng mẫu sẽ được phân tích một, vấn đề này buộc các nhà cấp dưỡng phải thăng bằng giữa năng suất máy và quality phân tích.

Ngoài định lượng A1c với A0, các huyết sắc tố không bình thường khác hoàn toàn có thể được phát hiện tại trên biểu thứ sắc ký kết như: HbF (huyết sắc đẹp tố bào thai), HbA1a/b (huyết nhan sắc tố phụ), CarHb (carbamylated Hb), HbS (hồng mong hình liềm). Đây là một ưu thế vượt trội của đối chiếu HbA1c bởi sắc ký kết lỏng tính năng cao (HPLC), do khi xuất hiện các thay đổi thể hemoglobin, kết quả HbA1c không đề đạt đúng mức con đường huyết trung bình. Năm 2010, hiệp hội cộng đồng đái toá đường Mỹ (ADA) sẽ công bố HbA1c xác minh bằng HPLC được coi là tiêu chuẩn cho chẩn đoán đái cởi đường.

Xem thêm: Cậu Nhỏ Và Cô Bé - Cảm Giác Khi Đưa Cậu Bé Vào Cô Bé Thế Nào

Do những phòng xét nghiệm so với HbA1c theo các cách thức khác nhau (HPLC, AC, CE, IA, EA), nên kết quả thu được sẽ không còn giống nhau. Vì vậy, việc chuẩn hóa phương thức đo HbA1c là cực kỳ quan trọng. Theo đó, HPLC được coi là tiêu chuẩn chỉnh vàng, là cách thức tham chiếu của các phương thức khác, được sử dụng trong các nghiên cứu và phân tích của Viện phân tích đái tháo dỡ đường Anh (UKPDS) cùng Viện demo nghiệm các biến triệu chứng và kiểm soát và điều hành đái tháo dỡ đường (DCCT).

Hình ảnh: Mô bỏng nguyên lý cách thức sắc ký thảo luận ion (Ion exchange chromatography)

Hình ảnh: Sắc ký đồ IEC: chạy trong 70 giây, A1c và A0 được phân tác, những huyết dung nhan tố phụ X, Y rất có thể nhìn thấy. Không tồn tại đường phân tách bóc cơ sở (baseline separation), được kiểm soát nghiêm ngặt bởi phần mềm (calibration, cấu hình thiết lập ngưỡng và mặt đường cơ sơ) và

2. Điện di mao cai quản (Cappilary electrophoresis)

Điện di mao quản là 1 trong những kỹ thuật phân bóc tách dựa bên trên sự dịch chuyển khác nhau của những hemoglobin mang điện tích khác biệt trong cột mao quản, dưới tác động của năng lượng điện trường tạo ra bởi điện áp cao chũm 10kV.

Hình ảnh: nguyên lý phân tích của kỹ thuật năng lượng điện di mao quản (CE).

Hình ảnh: Các điểm lưu ý trên năng lượng điện di đồ. A1c với A0 được phân bóc với nhau trọn vẹn và với huyêt dung nhan tố phụ X/Y. Quá trình ra mắt trong 300 giây, kéo dài ra hơn IEC. Giống như IEC, CE cũng phát hiện tại được các biến thể huyết sắc tố.

3. Sắc cam kết ái lực (Affinity Chromatography)

Sắc ký ái lực phân tích những hemoglobin được glycate hóa (GHb, không chỉ có mỗi HbA1c) cùng hemoglobin không glycate hóa (NGHb, không chỉ mỗi HbA0)

Glucose vào GHb gồm ái lực cùng với acid boronic, trong lúc NGHb thì không. Cho nên vì thế NGHb chạy tự do qua cột resin lấp acid boronic, trong những lúc đó GHb bị cản trở rồi tiếp đến phân tách bóc khỏi NGHb. Điều này khiến cho sắc ký kết đồ của AC không giống như IEC và CE, NGHb lộ diện trước, sau đó là Hb.