Phương pháp phổ huỳnh quang
Quang phổ huỳnh quang đãng (còn gọi là fluorometry hoặc spectrofluorometry) là 1 trong những loại quang quẻ phổ năng lượng điện từ so sánh huỳnh quang xuất phát từ một mẫu. Nó bao gồm việc sử dụng một chùm ánh sáng, hay là ánh nắng cực tím, kích thích các electron trong số phân tử của một số hợp hóa học nhất định và khiến cho chúng phạt ra ánh sáng; Thông thường, nhưng mà không nhất thiết, có thể nhìn thấy ánh sáng. Một kỹ thuật bổ sung cập nhật là quang quẻ phổ hấp thụ. Vào trường hợp quan trọng của quang phổ huỳnh quang đãng một phân tử đơn, sự giao động cường độ từ ánh sáng phát ra được đo từ các fluorophores, hoặc các cặp fluorophores.
Bạn đang xem: Phương pháp phổ huỳnh quang
Các vật dụng đo huỳnh quang đãng được hotline là fluorometers.
Lý thuyết Các phân tử có nhiều trạng thái điện thoại tư vấn là nút năng lượng. Quang đãng phổ huỳnh quang chủ yếu liên quan liêu đến những trạng thái năng lượng điện tử và dao động. Chú ý chung, những loài đang được kiểm tra gồm một trạng thái điện tử mặt khu đất (trạng thái tích điện thấp), với một trạng thái điện tử kích phù hợp có năng lượng cao hơn. Trong những trạng thái điện tử này có không ít trạng thái rung hễ khác nhau.
Trong huỳnh quang, những loài thứ nhất được kích thích, bằng phương pháp hấp thụ một photon từ trạng thái cơ phiên bản điện tử của chính mình cho trong số những trạng thái dao động khác nhau trong trạng thái điện tử phấn khởi. Va chạm với các phân tử khác gây ra các phân tử kích đam mê để mất năng lượng rung động cho tới khi nó là tâm trạng rung cồn thấp nhất của trạng thái điện tử kích thích. Quy trình này thường được tưởng tượng bằng sơ trang bị Jablonski
Phân tử này tiếp nối giảm xuống một mức độ rung động khác nhau của trạng thái năng lượng điện tử trở lại, phạt ra một photon trong quy trình này. Các phân tử rất có thể rơi xuống bất kỳ mức độ rung rượu cồn nào trong tâm lý cơ bản, những photon vạc ra đã có tích điện khác nhau, và cho nên tần số. Vì đó, bằng cách phân tích những tần số khác biệt của ánh sáng phát ra trong quang phổ huỳnh quang, cùng rất cường độ kha khá của họ, kết cấu của những cấp độ rung rượu cồn khác nhau rất có thể được xác định.
Đối với các loài nguyên tử, quy trình này tương tự; mặc dù nhiên, vì những nguyên tử không tồn tại mức tích điện rung động, các photon phân phát xạ hay ở cùng một cách sóng như phản xạ tới. Quy trình này tái phát photon bị dung nạp là “huỳnh quang cùng hưởng” và trong những lúc nó là đặc trưng của huỳnh quang quẻ nguyên tử, phân tử huỳnh quang đãng được bắt gặp trong giếng.
Trong một phép đo huỳnh quang thông thường (khí thải), cách sóng kích ham mê là cố định và quá trình sóng phát hiện tại khác nhau, trong những khi huỳnh quang quẻ trong việc phát hiện bước sóng kích thích thống kê giám sát là cố định và thắt chặt và quá trình sóng kích ưa thích là khác nhau giữa các quanh vùng quan tâm. Một phiên bản đồ phạt xạ được đo bằng cách ghi lại phổ phân phát xạ hiệu quả từ một loạt công việc sóng kích phù hợp và kết hợp tất cả bọn chúng với nhau. Đây là một bề mặt ba chiều tập vừa lòng dữ liệu: cường độ phát xạ là 1 hàm của kích thích với phát cách sóng, và thường được diễn đạt như một phiên bản đồ đường viền.
